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公司基本資料信息
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SILAC即細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture,SILAC),其實(shí)驗(yàn)原理是在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入輕、中或重型穩(wěn)定同位素標(biāo)記的必需氨基酸(賴氨酸和精氨酸),通過細(xì)胞的正常代謝,使新合成的蛋白帶上穩(wěn)定同位素標(biāo)簽。等量混合各類型蛋白質(zhì),酶解后進(jìn)行質(zhì)譜分析。通過比較一級(jí)質(zhì)譜圖中同位素峰型的面積大小進(jìn)行相對(duì)定量,同時(shí)二級(jí)譜圖對(duì)肽段進(jìn)行序列測(cè)定從而進(jìn)行蛋白鑒定。
技術(shù)優(yōu)點(diǎn)
活細(xì)胞水平標(biāo)記技術(shù),標(biāo)記效果穩(wěn)定,其標(biāo)記效率不受裂解液的影響。標(biāo)記效率較高。
樣本需求量少,通常每個(gè)樣品需要幾十微克的蛋白量。
采用質(zhì)譜定量,可同時(shí)鑒定并定量多種蛋白質(zhì)。
多個(gè)樣品混合后同時(shí)進(jìn)行分離、酶切和鑒定,后續(xù)實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品的影響是一致的,減少了實(shí)驗(yàn)操作和儀器設(shè)備產(chǎn)生的影響,具有精密度和重現(xiàn)性。
標(biāo)記采用的是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù),接近樣品真實(shí)狀態(tài)。
技術(shù)平臺(tái)
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion? Tribrid?
應(yīng)用領(lǐng)域:
機(jī)理和調(diào)控機(jī)制研究
動(dòng)態(tài)過程中機(jī)制研究
疾病標(biāo)志物的篩選
用藥及預(yù)后標(biāo)志物篩選
http://www.abace-biology.com/SILAC.htm
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