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泰克生物一直致力于開發(fā)單克隆抗體，在抗體開發(fā)和工程抗體所需的平臺方面擁有超過8年的經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)出了不同的抗體庫，用于抗體篩選、抗體測序、抗體人源化等。泰克生物投資了尖端技術(shù)，使用復雜的工程、計算機3-D 建模和合成生物學技術(shù)生產(chǎn)定制的雙特異性抗體。從客戶的需求出發(fā)，泰克生物可以幫助客戶設計、開發(fā)和驗證用于研究和臨床前的雙特異性抗體。
雙特異性抗體（bsAbs）是抗體含有不同的表位（通常在兩個單獨的抗原表位）即兩個抗原結(jié)合位點。通常，一種結(jié)合特異性針對靶細胞的特定細胞表面抗原，而另一種針對效應細胞表面上的“觸發(fā)”分子，例如FcγR或CD3/T細胞受體復合物之一。
雙特異性抗體可以超越效應細胞對其天然靶標的特異性，并將其重定向以殺死原本會忽略的靶標。不同的細胞毒性表達不同的觸發(fā)分子（受體）。因此，通過改變靶標和效應子結(jié)合域的特異性，可以針對大多數(shù)類型的靶細胞產(chǎn)生多種效應子反應?；蛘撸梢酝ㄟ^將一種結(jié)合特異性靶向血清免疫球蛋白來賦予全范圍的效應子功能（即 ADCC、吞噬作用、補體激活和延長的血清半衰期）。
目前，市場上有兩種用于治療的雙特異性抗體。由于其不同的作用機制，雙特異性抗體越來越受到關(guān)注，更多的雙特異性抗體正在進行臨床試驗，不僅針對癌癥，還針對其他疾病。
█ 如何制備雙特異性抗體
泰克生物已經(jīng)開發(fā)了許多方法來產(chǎn)生雙特異性抗體。雜交瘤是較早用于生產(chǎn)雙特異性抗體的技術(shù)。它基于表達所需特異性鼠 IgG 的兩種不同雜交瘤細胞系的體細胞融合。然而，功能性雙特異性抗體的真實百分比是不可預測的，并且需要復雜的過程來從副產(chǎn)物中分離雙特異性抗體。
通過使用分子克隆技術(shù)，可以從同一生產(chǎn)細胞中表達兩條不同的重鏈和輕鏈組裝雙特異性 IgG 抗體。雙特異性抗體的生產(chǎn)需要至少兩個用于異二聚化重鏈的質(zhì)粒和一個用于共同輕鏈的質(zhì)粒或兩個輕鏈質(zhì)粒（如果使用兩條不同的輕鏈）。值得注意的是，建議在不同的質(zhì)粒上表達 HC 和 LC，因為控制質(zhì)粒比例是一種簡單有效的方法，可以優(yōu)化所需產(chǎn)品的蛋白質(zhì)組裝。隨后，通常需要一個費力且耗時的過程來從異質(zhì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染池中選擇最理想的克隆細胞系，以進行大規(guī)?？贵w生產(chǎn)。
與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染相比，瞬時轉(zhuǎn)染可以在幾天內(nèi)獲得結(jié)果，而無需將重組 DNA 整合到宿主基因組中。人類胚胎腎 (HEK293) 和基于 HEK 的 Expi 293 細胞是用于瞬時表達的人類細胞，已在bsAb 開發(fā)的早期使用。
█ 服務內(nèi)容
步驟 | 內(nèi)容 |
基因合成 | 生成多達 3 個不同設計的序列，從頭生成重組抗體 DNA 質(zhì)粒 |
小試 | 雙特異性抗體蛋白的產(chǎn)生→小規(guī)模表達到哺乳動物細胞系中→通過 SDS-PAGE驗證→通過ELISA與重組蛋白抗原的結(jié)合分析→將克隆與親本抗體進行比較。 |
鑒定 | 前 2 個全長雙特異性抗體的表達→通過ELISA進行結(jié)合分析→抗小鼠抗體識別的抗體的ELISA評估。 |
生產(chǎn) | 大規(guī)?？贵w生產(chǎn) |
█ 附加檢測服務
步驟 | 內(nèi)容 |
流式細胞儀分析 | FACS與抗原陽性細胞系的結(jié)合分析 |
BLI 結(jié)合分析 | 通過 Octet 系統(tǒng)生物層干涉法進行抗體結(jié)合親和力分析 |
Biacore TM SPR 生物傳感器 | 使用 Biacore TM SPR 生物傳感器進行結(jié)合和動力學分析以確定抗體親和力、Ka、Kd、KD 值 |
█ 服務優(yōu)勢
? CHO 細胞中的高蛋白表達
? 非常穩(wěn)定：在 37 °C 的血清中 >2 周
? 無溶解度問題：> 30 mg/ml
? 開發(fā)了許多不同的具有腫瘤抗原的穩(wěn)定細胞系，以驗證許多雙特異性抗體