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氮代謝是氨的同化及蛋白質(zhì)等有機氮化合物的合成、分解的轉(zhuǎn)化過程。同時它也是植物的基本生理過程之一，參與地球化學循環(huán)的重要組成部分，植物氮素同化的主要途徑是經(jīng)過硝酸還原為銨后直接參與氨基酸的合成與轉(zhuǎn)化，期間硝基還原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酰胺合酶(GOGAT)、天冬酰胺轉(zhuǎn)氨酶(AspAT)等關鍵酶參與了催化和調(diào)節(jié)，以氨基酸為主要底物在細胞中合成蛋白質(zhì)，再經(jīng)過對蛋白質(zhì)的修飾、分類、轉(zhuǎn)運及儲存等，成為植物有機體的組成部分，同時與植物的碳代謝等協(xié)調(diào)統(tǒng)一，共同成為植物生命活動的基本過程。
標準品和尿樣中氮代謝物的液相色譜圖
迪信泰檢測平臺采用液質(zhì)聯(lián)用法，使用Agilent 1260 Infinity型高效液相色譜儀對樣品進行分離，結(jié)合DAD檢測器對樣品進行鑒定或采用液質(zhì)聯(lián)用的方法：使用Thermo Scientific的U3000快速液相色譜對樣品進行分離，結(jié)合Thermo Scientific? Q Exactive?對樣品進行鑒定，可高效、精準的檢測氮代謝物的含量變化。目前可檢測的氮代謝物包括尿素、肌氨酸酐、肌酸等。對于常見氮代謝物或以上氮代謝物的同類物質(zhì)，可結(jié)合標樣進行檢測，對于稀有的氮代謝物分子，如提供標準樣品，迪信泰檢測平臺可提供定制檢測。對于氮代謝過程所需要的關鍵酶，迪信泰檢測平臺可提供試劑盒測定服務。此外，我們還提供生化法氮代謝類物質(zhì)測定服務，以滿足您的不同需求。
樣品制備
植物氮代謝物的提取方法:（此部分涉及到公司的核心工藝，以下提供常規(guī)的提取工藝）
1）稱量約20 mg的樣品；
2）液氮研磨；
3）加入2 mL的甲醇超聲提取30 min；
4）離心，取1.5 mL濾液；
5）旋干，加入0.5 mL甲醇復溶
6）0.45 μm的微孔濾膜過濾，用HPLC-MS檢測。
動物氮代謝物的提取方法(以尿液為例)：
1）取新鮮的晨尿2 mL；
2）8000 rpm離心5 min；
3）取1.5 mL上清液；
4）用乙酸銨緩沖液稀釋10倍；
5）0.45 μm的微孔濾膜過濾，用HPLC檢測。
迪信泰檢測平臺可檢測氮代謝類物質(zhì)項目
| 可測物質(zhì) | 周期 |
|---|---|
| 植物硝態(tài)氮 | 2-3 |
| 植物銨態(tài)氮 | 2-3 |
| 尿素氮 | 2-3 |
| 脲酶(UE) | 2-3 |
| NO含量 | 2-3 |
| 水土中亞硝酸鹽 | 2-3 |
| 食品中亞硝酸鹽 | 2-3 |
| 谷氨酰胺合成酶(GS) | 2-3 |
| 谷氨酸合成酶(GOGAT) | 2-3 |
| 谷氨酸脫氫酶(GDH) | 2-3 |
| 谷氨酰胺酶(GLS) | 2-3 |
| 硝酸還原酶(NR) | 2-3 |
| 亞硝酸還原酶(NiR) | 2-3 |
| 其他氮代謝類物質(zhì) | 請聯(lián)系技術支持19158843257 |
LC-MS測定氮代謝類物質(zhì)樣本要求：
1. 請確保樣本量大于0.2g或者0.2mL，測定樣品不返還，請您保留備份。
周期：2~3周
項目結(jié)束后迪信泰檢測平臺將會提供詳細中英文雙語技術報告，報告包括：
1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關參數(shù)（中英文）
3. 質(zhì)譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 氮代謝類物質(zhì)含量信息